Motosiklet Günlüğü, Ernesto Guevara ile Alberto Granado’nun Güney Amerika’da çıktıkları motosiklet yolculuğunu anlatıyor. İki arkadaş, 1950’lerin başında Arjantin’den yola çıkar, Şili, Brezilya ve Peru’ya doğru ilerler. Başta amaçları eğlenmek ve yeni yerler görmektir. Yolda karşılaştıkları insanlar, kasabalar ve zorlu yaşam koşulları Ernesto’nun bakışını değiştirmeye başlar. Alberto ise bu uzun yolculukta ona eşlik eder, kimi zaman destek olur, kimi zaman da aynı sıkıntıları paylaşır. Yol boyunca genç Ernesto, gördüklerini içselleştirir ve kendi hayatına dair başka bir yol düşünmeye başlar.